Name: Tạo dòng và biểu hiện interleukin 2 (IL-2) người tái tổ hợp trong Escherichia coli
Brand: Đề tài - Dự án
SKU: WW-2443-GTBBN
Availability: InStock

Tạo dòng và biểu hiện interleukin 2 (IL-2) người tái tổ hợp trong Escherichia coli

Tác giả: Châu Thiện Ngọc

Định dạng tài liệu: Đề tài - Dự án

Nghiên cứu được thực hiện nhằm tạo dòng và biểu hiện protein interleukin 2 (IL-2) người tái tổ hợp trong vi khuẩn Escherichia coli nhằm phục vụ cho mục tiêu sản xuất IL-2 với chi phí thấp.

Phí Download:

Miễn phí

Tổng quan về tài liệu
Đánh giá

Gen il2 được khuếch đại bằng phương pháp PCR từ plasmid pIDT-IL2 với cặp mồi đặc hiệu chứa vị trí nhận biết của enzyme BamHI và NdeI. Sản phẩm PCR sau đó được cắt bằng hai enzyme này và gắn vào vector biểu hiện pET-His để tạo plasmid tái tổ hợp pET-il2 dưới sự điều khiển của promoter T7. Plasmid tái tổ hợp được biến nạp vào chủng E. coli Origami(DE3) để tạo dòng tế bào mang plasmid biểu hiện. Dòng vi khuẩn tái tổ hợp được cảm ứng bằng IPTG nồng độ 0,5 mM và protein IL-2 được biểu hiện mạnh dưới dạng thể vùi trong tế bào chất. Sự biểu hiện của protein mục tiêu được xác nhận bằng phương pháp SDS-PAGE và Western blot sử dụng kháng thể kháng IL-2.